無菌室空氣質(zhì)量檢查應(yīng)按照采樣計(jì)劃，根據(jù)情況對處于空態(tài)、靜態(tài)和正常運(yùn)行的風(fēng)險(xiǎn)區(qū)，使用適當(dāng)?shù)膬x器采集空氣中微生物，測定并監(jiān)控風(fēng)險(xiǎn)區(qū)空氣的微生物污染。空氣懸浮微生物的采樣和計(jì)數(shù)方法多種多樣，根據(jù)不同采樣目的決定具體的采樣方法和采樣器。因采樣器的采集效率不同，應(yīng)慎重選擇合適的方法和設(shè)備。采樣器分為兩類：被動(dòng)式采樣器，如落菌盤；主動(dòng)式采樣器，如過濾采樣器、撞擊采樣器、沖擊采樣器等。

1、沉降法

落菌盤等被動(dòng)式空氣微生物采樣器不能測量空氣中的微生物的總數(shù)，而是測量空氣中微生物在表面的沉降率。只要確定單位時(shí)間落菌盤上微生物的數(shù)量，再根據(jù)落菌盤的暴露面積與暴露時(shí)間之間的關(guān)系，即可大致計(jì)算出空氣中微生物的數(shù)量。

面積小于30m2的室內(nèi)設(shè)一條對角線取3點(diǎn)，在其中心以及兩端距墻1m處各取1點(diǎn)；面積大于30m2的室內(nèi)房間四面距墻1m和中央各放置一個(gè)平皿，高度為實(shí)驗(yàn)臺(tái)高度。培養(yǎng)基平皿開蓋暴露10min，然后蓋上蓋子倒放，培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)每個(gè)平皿上的菌落數(shù)。

日常監(jiān)控時(shí)，可以設(shè)定可接受的菌落數(shù)限值。一般無菌室所有的取樣平皿上的細(xì)菌總數(shù)應(yīng)小于15個(gè)。空氣質(zhì)量良好的無菌室，通常每個(gè)平皿上生長的細(xì)菌不超過2個(gè)菌落數(shù)。

2、空氣過濾法

空氣采樣除了自然沉降法外，還可以使用專門的主動(dòng)式采樣器。主動(dòng)式采樣器可以評估風(fēng)險(xiǎn)區(qū)空氣微生物的特征。主動(dòng)式采樣器主要包括過濾采樣器、撞擊采樣器、沖擊采樣器等。

撞擊采樣器可以分為狹縫式采樣器、離心式采樣器和針孔式采樣器。狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣，通過采樣器的縫隙式平板，將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉(zhuǎn)的平板培養(yǎng)基表面上，附著的活微生物粒子經(jīng)過培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。離心式采樣器由于內(nèi)部風(fēng)機(jī)的高速旋轉(zhuǎn)，氣流從采樣器前部吸入從后部流出，在離心機(jī)的作用下，空氣中的活微生物粒子有足夠的時(shí)間撞擊到專用的固形培養(yǎng)條上，經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。

過濾式空氣采樣器是最常用、最簡單的空氣采樣器。過濾式采樣器有采樣頭、濾器、流量計(jì)和抽氣泵組成。過濾式采樣器的結(jié)構(gòu)如圖：

開動(dòng)電機(jī)后，抽氣泵工作，帶動(dòng)空氣吸入采樣頭，空氣通過濾器的時(shí)候，大于濾膜孔徑的顆粒被阻留，當(dāng)達(dá)到預(yù)先設(shè)定吸氣體積后抽氣泵停止工作，將濾膜取出轉(zhuǎn)貼到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)算空氣中微生物的濃度。過濾式采樣器捕獲效率高，但是濾膜材料可能影響微生物的存活率，還有采樣阻力大、流量易變的缺陷。

在沒有空氣采樣器的情況下，可以自己組裝如下圖的空氣錯(cuò)率采樣裝置，注意組裝連接處必須密不透風(fēng)。

打開圖中大瓶的龍頭，空氣就被抽入無菌水中。待4L水流完，就有4L空氣通過小瓶中的無菌水，也就是4L空氣中的微生物被留存在50mL無菌水中。無菌吸取1mL過濾的水樣進(jìn)行平板計(jì)數(shù)，做2個(gè)平行。37℃培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)。

每升空氣中的細(xì)菌數(shù)為：2個(gè)平皿上細(xì)菌數(shù)量的平均值×50/4。